*步、先將培養操作室形成厭氧環境：

1、按使用要求在培養操作室內放置除氧催化器及已封閉的培養皿等。500g鈀粒除氧劑（密封狀態）和500克干燥劑。

2、按下電源開關，關緊取樣室內、外門，按下真空泵按鈕將取樣室抽成負壓（見真空表指針指向

0.06MPa）。

3、要將培養操作室內的氧氣含量達到極微量狀態，須經三次氣體置換：（1）*次氣體置換，

純度為99.99％的氮氣。操作如下：

    把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊。按下箱內氮氣進開關，氮氣即達到充足狀態，再按動此開關，即關閉。雙手伸入乳膠手套，并隨即踏腳踏開關，氮氣即會漸漸充入培養室。（2）第二次氣體置換（氮氣置換），重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。（3）第三次置換混合氣體，混合氣體配比為：N2↑90%、H2↑5%、CO2↑5%，純度均為99.99％。先將取樣室抽真空，至真空表指針指向0.06MPa。按下箱內混合氣進開關，混合氣體達到充足狀態，再按動此開關，即關閉。按下箱內混合氣微調開關，使混合氣體按一定的流量充入培養室。通過三次換氣后，培養操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。

4、培養操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧。

5、用戶使用前或使用后如需操作培養室、取樣室滅菌，可打開內置培養箱外門即取樣室內門，后開啟控制面板殺菌開關，可將操作室等進行滅菌處理。時間長短可根據用戶實際需要自定。操作該功能注意事項詳見系統化“注意事項”第（7）條。

第二步、將菌種置入和培養

1、檢查取樣室內門并將它關緊。

2、打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門。

3、完成取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空至0.06MPa以上停，然后人工打開過道氮氣進開關，當指針回復零位后關掉過道氮氣進開關。重復以上操作進行第二次氮氣置換。第三次氣體置換操作時，抽真空度0.06MPa以上停，然后打開過道混合氣進開關充進混合氣體，當指針回復零位后關掉過道混合氣進開關。取樣室充氣置換三次過程結束。

4、為保證培養操作室厭氧環境不被破壞，選取較低真空度進行充氮置換時應增加置換次數。

5、開啟取樣室內門，將菌種從取樣室移入培養操作室，再將取樣室內門關緊，再抽真空檢

查內門是否關緊。

6、如培養箱需要長期連續使用，則必須：（1）每天在培養操作室內觀察，如發現不正常就必須更換氣體。（2）如用戶在操作時，由于產品結構的原因，在停止供氣12小時以后，有可能存在極微量的滲漏，或培養所需菌種需求要求微量混合氣體的補充時，可經內置過濾器連續輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧氣結合并被催化吸收，保證箱內厭氧狀態，補入混合氣流量為每分鐘10ml左右。（3）連續培養一天，更換一次除氧劑和干燥劑。

7、培養操作室內溫度可在溫控范圍內任意選擇和控制。

8、混合氣瓶，氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力為0.02Mpa左右。

注意事項及產品維護和保養：

1、儀器盡可能安裝在空氣清潔，溫度變化較小的地方。

2、開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明書，掌握正確使用方法。

3、培養物必須在培養操作室達到無氧環境后放入。

4、如發生故障（停氣等原因）培養操作室內仍可保持12小時厭氧狀態。（超過12小則需要把培養物取出另作處理）。

5、經常注意氣路有無漏氣現象。

6、當氣瓶氣體用盡，總輸出壓力小于0.1Mpa時，應盡快調換氣瓶，調換氣瓶時注意要扎緊氣管，避免管內流入含氧氣體。

7、殺菌燈如需開啟時，由于殺菌燈管能輻射出強烈的2537Å短波紫外線，對核酸蛋白質作用特別強。能使細菌發生變異殺死，同時，紫外線對有機細胞具有殺傷力。人的眼睛和皮膚較長時間暴露在紫外線下會造成灼傷。所以，必須開啟時應拿出操作室或培養室中的培養物。開啟后應及時離開紫外線輻射之外，以免造成人體不舒，如頭痛、胸悶、暈眩等現象。

8、整機無電，可檢查電源插入端有無220V電源插入，如有電源可拔下插頭，檢查控制面板上熔斷器是否熔斷。如屬熔斷需有電工或電器知識的人員調換或檢修，也可垂詢生產廠家，請勿自行調換，以免可能發生意外和造成不需要的損失。

9、在初設氣體置換或培養結束釋放混合氣體時，應打開實驗室門窗或將通風口打開，以加速氣體的流通。減少釋放氣體超標吸入人體而引起不適。